سازمان جهانی مبارزه با دوپینگ (WADA) در پی یافتن راهکاری برای شناسایی و مبارزه با نوع جدید و پیچیدهای از دوپینگ است که در آن با ایجاد تغییراتی در ژنهای یک ورزشکار، توانمندیهای وی افزایش پیدا میکند. این سازمان، قانون منع دوپینگ از طریق ویرایش ژنتیکی را که از سال ۲۰۰۳ میلادی اجرایی و ابلاغ شده، تمدید کرده است؛ اما چگونگی اجراییشدن آن هنوز مشخص نیست. در سال ۲۰۰۰، جری لانگمن مقالهای در روزنامهی نیویورک تایمز نوشت و در آنجا سوالاتی را عنوان كرد كه بحثهای متعددی را در كمیتـهی بینالمللی المپیک و سازمان مبارزه با دوپینگ به راه انداخت. او در این مقاله سؤال كرد:
آیا در آینده ممكن است با تزریق ژنی به عضلات ورزشكاران، تارهای انقباضی عضلهی آنها را افزایش داد، و دوندهی سرعتی را قادر ساخت تا مسافت ۱۰۰ متر را در ۶ ثانیه بدود، یا از طریق همین روش بـا تزریق ژنی دیگـر ظرفیت حمل اكسیژن را در ورزشكاران را طوری افزایش داد كه یک دوندهی ماراتون مسافت ۲۶.۲ مایل را در كمتر از یک ساعت و نیم بدود؟
پیش از این، کمیتهی بینالمللی دوپینگ هر نوع دخالت در ساختار ژنتیکی انسان را که موجب افزایش توانمندیهای انسان شود، ممنوع کرده بود. از سال ۲۰۱۸ استفاده از هر نوع ژن ویرایش یا طراحیشده برای تغییر توالی ژنوم، تنظیم رونویسی، تولید مصنوعی بیان ژنهای انسانی بهکلی ممنوع شده است. دوپینگ ژنتیکی در تعریف علمی به ایجاد تغییرات در ژنهای انسان و افزودن ژنهای جدید به بدن یک فرد، گفته میشود. این فناوری از سال ۲۰۱۲ با جهشی خیرهکننده و سریع روبهرو بوده و با بهرهگیری از روش کریسپر (CRISPR) بهسادگی امکانپذیر شده؛ آزمایشهای رسمی نخستین نمونهی انسانی نیز در حال انجام است. در همین زمینه مگی دوراند سخنگوی کمیتهی بینالمللی دوپینگ اعلام کرد:
افرادی که از این روش درمانی استفاده میکنند، در رقابتهای ورزشی از توانمندی و استقامت بیشتری برخوردار خواهند بود. میزان و اندازهی این توانمندیها به نوع روش درمانی استفادهشده مرتبط است.
بهطور کلی افزایش عملکرد توسط دوپینگ ژنی، فراتر از توانایی عادی فرد است و در واقع امکان اثبات این نوع از دوپینگ اصلا آسان نیست. در دوپینگهای غیرژنتیکی اغلب مواد پروتئینی مانند اریتروپویتین (Erythropoietin) به ورزشکاران تزریق میشود که هورمونی طبیعی در بدن است و از کلیه ترشح و باعث افزایش سلولهای قرمز خون و افزایش اکسیژنرسانی به عضلات میشود و بدون تردید با افزایش غلظت خون شخص را مستعد بیماریهایی مانند گرفتگی عروق و سکته، میکند. در دوپینگ ژنتیکی، با وارد کردن مواد پیشساز غیرپروتئینی یعنی RNA وDNA، سعی میکنند توان فیزیکی ورزشکاران را افزایش دهند.
مواد غیرپروئتینی مانند کد دستوری عمل میکند و باید طی یک سری مراحل در سلول به پروتئین ترجمه شود. کنترل ورود این مواد به سلولهای خاص، تنظیم و ترجمهی آنها کار سختی است و ممکن است عوارض آنها خیلی بیشتر از مواد دوپینگ پروتئینی باشد. دوپینگ ژنتیکی با تجویز مستقیم مواد ژنتیکی به شخص یا بیوپسی بخشی از سلولهای شخص و اضافه کردن مواد ژنتیکی به سلولها و بازگردانی آنها به بدن میتواند انجام بگیرد. از جمله روشهای تشخیص آن ردیابی پروتئینهای نوترکیب است که حاصل ترجمهی این مواد ژنتیکی یا ردیابی حامل آنها است.
بخش مهمی از عملکرد هر شخص در ورزش تحت تأثیر ژنوم او است. بهطور معمول ۵۰ درصد از تفاوتهای افراد در استعداد ذاتی یا نحوهی پاسخ او به تمرینها، میتواند توسطژنتیک توضیح داده شود. در هر زمینهی ورزشی، دادن بهترین نسخه از هر ژن، عملکرد ورزشکار را بهطور قابل توجهی افزایش خواهد داد. حتی بهتر از آن اگر بتوانیم بهراحتی ژنها را دستکاری کنیم (که این عمل با ظهور تکنولوژی کریسپر بهسادگی انجامپذیر خواهد بود) میتوانیم حتی نسخهای بهتر از حالت طبیعی ژن بسازیم، بدین ترتیب مقدار فرافیزیولوژیکی از محصولات یک ژن کلیدی را به ورزشکار دادهایم. به عبارتی میتوانیم ورزشکارانی با تواناییهای ابرانسانی بهوجود آوریم.
نتیجهی اصلاح ژنتیکی بستگی به نوع ژنی دارد که به بدن شخص منتقل میشود، بنابراین انتخابهای فراوانی وجود خواهد داشت. درواقع، دوپینگ ژنی برای تمامی رشتههای ورزشی قابل استفاده است و میتواند توانایی ورزشکار را در زمینههای متعدد افزایش دهد. با کشف تکنیک کریسپر، پژوهشها روی ایجاد جهش در ژنها با این روش آغاز شد و دانشمندان بهجای اضافه کردن مواد ژنتیکی به فکر تغییر ژنتیک خود فرد افتادند. این کار گرچه روشی ساده و سریع به نظر میرسد؛ اما عوارض آن هنوز کاملا شناختهشده نیست و به زمان بیشتری برای پژوهشها نیاز دارد. ارو مانتورانتا، اسکیباز فنلاندی برندهی هفت مدال المپیک، در گیرندهی اریتروپویتین خود یکجهش ژنتیکی (بیماری پلیسیتمی) داشت که باعث افزایش توان بدنی او میشد.
تشخیص جهشهای ژنتیکی ارثی و غیرارثی ممکن است با روش جدید سخت باشد، ولی کسی که جهش ارثی دارد اغلب این جهش را در تمام سلولهای بدن دارد ولی کسی که دوپینگ ژنتیکی انجام داده است تنها در بخش کوچکی از سلولهایش آن جهش را خواهد داشت. به هرحال انجام این روش دوپینگ سخت و پرمخاطره و تشخیص آن امکانپذیر است. امروزه مشخص شده است كه ژنهای متعددی با انجام ورزش مرتبط هستند (حدود ۹۰ ژن) كه با توجه به گسـترهی ورزش و علاقهی روزافزون جهانی به آن، استفاده از این ژنها برای دوپینگ ژنی دور از انتظار نیست.
از فناوری ژنی میتوان بهرههای ارزشمندی نیز برد، مثلا برای درمان آسیبهای ورزشی شدید كه میتواند باعث كنارهگیری ورزشكار از صحنهی ورزش شود. مواد نیروزا میتوانند قدرت و استقامت ورزشکاران را بالا ببرند، با این وجود استفاده از این مواد خطرات زیادی به همراه دارد. اخیرا پژوهشگران در حال انجام پژوهشهایی روی دوپینگ ژنتیکی هستند تا ببینند آیا این تغییرات ژنتیکی روی انسان قابل انجام است یا خیر. اگر هیچ محدودیتی برای استفاده از داروهای نیروزا وجود نداشت، بدن انسان تا کجا پیش میرفت؟ این سوالی است که هنگام بازیهای المپیک مطرح شد.
گلن گاسمن، یکی از پزشکان یونان باستان به این اکتشاف خود که کارایی ورزشکاران با خوردن بعضی گیاهان بالا میرود، افتخار میکرد. اما حتی با استفاده از بهترین مواد نیروزا تا چه حد میتوان پیش رفت؟ با بالا رفتن هورمونها میتوان تا چهار درصد توانایی در دویدن را افزایش داد که همین تفاوت میتواند نفر اول و دوم را در مسابقات دوی ۱۰۰ متر جابهجا کند. در ورزشهای استقامتی قضیه متفاوت است، قدرت در این ورزشها زیاد مهم نیست و با مواد نیروزا استقامت افراد بالا برده میشود؛ این داروها میتوانند تا ۳۴ درصد استقامت را بالا ببرند. گلن و همکارانش در دانشگاه زوریخ دریافتند که اریتروپوییتن روی مغز تأثیرگذار است و میتواند انگیزهی فرد برای دویدن را افزایش دهد. ارنست، فیزیولوژیست ورزش از دانشگاه باث میگوید:
مواد نیروزا باعث سنتز ATP میشود و در نتیجه کارایی هشت درصد بالا میرود؛ با این وجود همهی این مواد عوارض جانبی دارند.
استروییدها بهطرز خطرناکی فشار خون را بالا میبرند که باعث مشکلات قلبی - عروقی میشود، همچنین این مواد رویاندامهای جنسی نیز تأثیرات مخربی دارند. بیشتر از ۱۰ سال است که صحبت از دوپینگ ژنتیکی است، به این ترتیب که با دستکاری ژن ورزشکاران کارایی آنها را بالا ببرند. پژوهشگران که در حال انجام پژوهش روی موشهای آزمایشگاهی هستند، توانستهاند با دستکاری ژن موشها قدرت عضلاتشان را تا ۱۴ درصد افزایش دهند، اما پیاده کردن این تغییرات روی انسانها کار سادهای نیست، زیرا تغذیه و بسیاری از فاکتورهای دیگر روی انسانها تأثیرات بیشتری دارد.
ممکن است در آیندهای نهچندان دور، ورزشکارانی که امروزه سعی در بالا بردن کارایی آنها است، از ابتدا بهوسیلهی تغییرات ژنتیکی کارایی بالایی پیدا کرده باشند. كامل شدن پروژهی ژنوم انسانی در سالهای اخیر و شـناسایی بـیش از ۲۰ تا ۲۵ هزار ژن مختلف و وظایف آنها، همچنین پیشرفتهای انجامشده در زمینهی ژندرمانی، عرصهی تازهای از روش دوپینـگ ژنی را در جوامع پیشـرفته بهویژه آمریكا پدید آورده است كه سبب بالا بردن توان و قدرت بدنی و افزایش عملكرد جسمانی ورزشكاران بهمقدار بسیار زیاد و بـاورنكردنی شده است.
در چند سال گذشته در كشور آمریكـا نـوعی از دوپینگ بـا مصرف مادهای شناساییناپذیر بهوجود آمده است كه به رسوایی چند ورزشكار بزرک انجامید. یک شركت آزمایشگاهی در کالیفرنیا با نام بالکو، شروع به ساختن هورمونهای استروئیدی طراحیشـدهای بـرای ورزشكاران مطرح جهان كرد كه در آزمایشهای دوپینگ قابل شناسایی نبودند. بهدنبال افشای این قضیه، معلوم شد كه بسیاری از ورزشکاران معروف آمریكا در رشتههای دومیدانی و بیسبال از این ماده استفاده کردهاند.
تخلفهای ورزشکاران نشان میدهد كه در آیندهای نزدیک، ممكن است از روشهای دوپینگی كه در آزمایشها قابل تشـخیص نیستند، به عرصهی ورزشی راه یابد و بهطور غیراخلاقی باعـث برتری استفادهكنندگان در مسابقات ورزشی شوند. با توجه به غيرقانونى بودن ژندرمانى برای بالا بردن توان جسمى و عضلانى و با تاكيد بر احتمال بروز حوادث جدى، به برخى از خطرات ايجادشده در پى انجام دوپينگ ژنى در ورزشكاران در زير اشاره مىشود:
۱. احتمال ايجاد شوکهاى شديد يا خفيف ايمنى يا سمى در پى استفاده از ناقلهاى ژنى و يا حساسيت به روش انتقال ژن.
۲. افزايش غيرطبيعى اريتروپويتين در افراد سالم ممكن است سبب بالا رفتن خطر بروز حملههاى قلبى شود، زيرا افزايش گلبولهاى قرمز باعث تغليظ خون میشود و احتمال ايجاد لختههاى خونى در رگها را بيشتر مىکند.
۳. در كسانى كه از روش دوپينگ نوع دوم براى تقويت ماهيچههاى خود استفاده مىكنند، ماهيچهها بهطور غيرطبيعى بزرگ میشوند و تاندونها و استخوانها را احاطه مىكنند كه ممكن است سبب پارگى يا شكستگى آنها شود.
۴. ژن انتقاليافته امکان دارد به درون DNA بيمار رسوخ كند و با تحریک پروتوانكوژن يا مختل كردن ژن سركوبگر تومور به ايجاد تومور منجر شود. البته بيان غيرمجاز يک ژن سرطانزا با نسل كنونى ناقلهاى ويروسى كه توانايى پروموترشان براى به حداقل رساندن بيان ژن هاى مجاور ميزبان تغيير يافتهاند، چندان محتمل نيست.
۵. غيرفعالسازى توالىهاى رمزكننده مىتواند يک عملكرد ضرورى ژن ميزبان را مختل كند. البته اين حالت فاقد اثر چشمگير است، زيرا چنين جهشهاى كشندهاى نادر هستند و فقط يک سلول را از بين مىبرند. بهدلیل اینکه محل اتصال يک ناقل ويروسى كم و بيش اتفاقى است، احتمال كمى وجود دارد كه يک ژن در بيش از يک سلول مختل شود.
الیزابت پریش از شرکت ضدپیری بایوویوا (BioViva) ادعا میکند که دو نوع ژندرمانی روی خودش انجام داده است که یکی از آنها مانع از تحلیل بافتهای ماهیچه میشود. به عبارت دیگر، حتی اگر ورزش نکنیم، ماهیچههایمان قدرتمند باقی میمانند و اگر ورزش کنیم زودتر رشد میکنند. معلوم نیست که آیا پریش واقعا چنین کاری را کرده است یا نه. با این حال، بایوویوا از همین حالا تماسهای زیادی از طرف ورزشکاران دریافت کرده است که میخواهند این نوع ژندرمانی را امتحان کنند.
کارشناسان ژندرمانی که روی روشهایی ژندرمانی کار میکنند میگویند که اغلب اوقات چنین تماسهایی دارند. هنوز هیچ موردی از ورزشکاری که به روش ژنتیکی بدنش را قویتر کرده باشد، مشاهده و تأیید نشده است، اما شاید علت این موضوع این باشد که هیچ یک از این روشها هنوز آزمایش نشدهاند. مقامهای ورزشی نسبت به این اقدام احتمالی کاملا جدی هستند.
ژندرمانی زمينهی آغاز دوپينگ ژنی
با ظهور تكنولوژی ژندرمانی امكان درمان هرگونه وضعیت خطرناک یا كشندهی بالینی، از راه تولید ژنهای مرتبط در بافت زندهی درون بدن و انتقال مواد بیوشیمیایی شامل پروتئینها و هورمونها به بافـت آسیبدیده و معیوب امکانپذیر شد. بهدنبال این پیشرفتها، بحـث در مـورد دوپینگ ژنی در سال ۲۰۰۱ آغاز شد. یعنی زمانی كـه كمیسـیون پزشكی كمیتهی بینالمللی المپیک، گروه متخصصان ژندرمانگر را برای برگزاری جلسهای در مور تأثیر ژندرمانی بر آیندهی ورزش فراخوانـد. خلاصهی مطالب گفتهشده در این جلسـه به این صـورت بـود: گـروه ژندرمانی، اسـتفاده از ژندرمـانی را بـرای جلـوگیری و درمـان برخـی از بیماریهای انسانی تأیید میكنند، هرچند این واقعیت را نمیتوان انکار کرد كـه ایـن روش ممكن است مورد سواستفادهی ورزشكاران قرار بگیرد. این گروه در تلاش هستند با طراحی شیوههایی از سواستفاده از این روش جلوگیری كنند.
در ســال ۲۰۰۲ نیــز سازمان مبارزه با دوپینگ، كنفرانسی را در رابطه با موضوع دوپینگ ژنی برگزار كرد. همچنین این موضوع یكی از بحثهای اصلی كنگرهی اروپا در مورد برنامههای آینده در سیاست ضددوپینگ در آرنهم هلند بود. در این كنگره مسئولان به این نتیجه رسیدند كه برای اقـدامات پیشـگیرانه در مورد این روش جدید دوپینـگ، همـهی دانشـمندان، پزشـكان معـالج، دولتها، سازمانهای ضددوپینگ و صنایع دارویی باید تلاش كننـد و تمام اطلاعات موجود شامل نظرات آموزشی، مقررات، نتایج پژوهشـی و روشهای تشخیصی بین این مراكز رد و بدل گردد.
كمیتـهی بینالمللـی المپیـک (IOC) روش دوپینـگ ژنـی را در سال ۲۰۰۳ در لیست طبقهبندیشده مواد و روشهای ممنوعهی خود قرارداد. بعد از این تصمیمگیریها، پژوهشهای زیادی در زمینهی عملكرد ورزشـی و علم ژنتیک انجام شد كه دستاوردهای متعددی را بهدنبال داشت. فرایند شناسایی و تفكیک ژنهای مـورد نظـر بـرای ویژگـیهـای مرتبط با اجرای ورزشی در طی سالهای اخیر شـتاب گرفـت و از سـال ۲۰۰۱ با پژوهشهای مختلف بـه روز شـد. طـرح بررسـی نقشـهی ژنـوم انسانی مرتبط با اجرا و آمادگی و همچنین بهداشت بین سالهای ۲۰۰۱ تا ۲۰۰۴ زمینههای متعددی از ارتباط ژنها با عملكـرد ورزشـی را نشـان میدهند.
درست است كه دوپینگ ژنی بر پایهی ژندرمانی بنا شده و یک روش درمان بالینی و مستلزم استفاده از اصلاح ژنی در بیماران است؛ اما در هـر حـال غیراخلاقـی است و پیامـدهـای خطرناكی را بـه دنبال خواهد داشـت. به دلیل مرگ چند نفر و آسیبهایی كه در پی ژندرمانی رخ داده است، ژندرمـانی خودبهخود خطرات بالقوهای را بهدنبال دارد، بهطور مثال مرگ نوجوان ۱۸ ساله كه بیماری كلیـوی داشـت و در دانشـگاه پنسـیلوانیا گلسینگر تحت ژندرمانی قرار گرفت، تـاكنون هـیچ پروتكـل ژندرمانیای برای عمل بالینی بـه تأییـد و تصـویب سازمان غذا و داروی آمریكا (FDA) نرسیده است.
طبق نظر كارشناسان، ژندرمانی را میتوان این طور تعریـف كـرد: انتقال مادهی ژنتیكی به سلولهای انسانی بـرای درمـان یـا پیشـگیری از بیماریها و ناهنجاریها كه این مواد میتوانند شامل DNA یا RNA یا سلولهای تغییریافته از نظر ژنتیكی، باشند. با توجه بـه ایـن تعریـف ژندرمانی را میتوان از طریق سه روش انجام داد، این روشها عبارتنـد از:
- تزریق DNA بهطور مستقیم به درون بدن: از این راه تنها تعداد معدودی از سلولهای بدن بهویژه سلولهای عضلانی قادر هستند بـهطـور مستقیم DNA را بگیرند یا جذب كنند.
- وارد كردن سلول دستكاریشده به بدن: در این روش در ابتـدا در آزمایشگاه، ژن جدید را وارد سلولها میكنند و بعد از آن سـلولهـای تغییر یافته را به بدن وارد میكنند.
- در روش سوم با یک ویروس اصلاحشده عفونت ایجاد و از آن طریق ژن جدید برداشت میشـود. انتقـال ویـروسهـا بـه تفنگ ژنی نیاز دارد كه از آن راه بتوان DNA خارجی را به داخل سلول منتقل كرد.
انتقال مستقیم ژن، ساده است ولی كارایی كمی دارد و محدود به سلولهای خاصی اسـت. اسـتفاده از ویـروس كـارایی بسـیار بالایی دارد چون همهی انواع سـلولهـای بـدن قـادر بـه دریافـت DNA مصنوعی هستند ولی اثرات جانبی بیشتری را بهدنبال دارد. هر كدام از روشهای بالا ممكن است در دوپینگ ژنی استفاده شود و از آن طریق ورزشكار توانایی خود را افزایش دهد. همانطور که گفته شد، حدود ۹۰ ژن با توان ورزشی ارتباط دارند و اسـتفاده از ایـن ۹۰ ژن به منظور دوپینگ ژنی میتواند بهطور بالقوه خطرناک باشند. با ایـن حـال تنها برخی از این ژنها بیشتر مورد بررسی قرار گرفتهاند كه در اینجا به توضیح برخی از آنها میپردازیم.
۱. عامل بیانكنندهی اندورفین (اندورفین و انكفالین)
درد عاملی هشداردهنده است كه نباید از آن چشمپوشی كرد. خسـتگی مفرط عضلانی منجر به افـزایش اسیدیتهی خون میشـود؛ عـوامل اسیدی و تولیدات جانبی سیستمهای انرژی، باعث تولیـد درد میشـوند که رهایی از آن میتواند به ورزشكاران در اجرای بهتر یا طولانیتر فعالیت ورزشـی كمك كند. اكثر ورزشكاران از برخی تسكیندهندههای موجود، برای رهایی از درد استفاده میكنند که اندورفین و انكفالین میتوانند جایگزینی برای اینگونه داروهای شیمیایی باشند. ژن بیانكنندهی ایـن عوامل ضددردی ممكن است برای رهـایی از درد سـودمند باشـد.
مطالعات جانوری پیشبالینی، نشان میدهد كه كـد كـردن این پپتیدها، اثراتی بر درک دردهای التهابی دارد. البته استفاده از ژنهای اندروفین برای رهایی از درد در مراحل ابتدایی است و زمان زیادی بـاقی مانده تـا از این ژنها برای كاهش فوری درد بیماران مبتلا به دردهای شـدید اسـتفاده شود. ژنهـای بیـانكننـدهی انـدورفین و انكفـالین عوامـل مسـدودكننـدهی گیرندههای درد را بیان میكنند. این عوامل با مسدود كـردن گیرنـدههـای درد، سطح تحمل فردرا افزایش میدهند و باعث تسكین درد میشوند.
۲. ژن بیانكنندهی هورمون اریتروپوئتین (EPO)
در سال ۱۹۶۴، مانتیرانتا توانست دو مدال طـلا را در بازیهای اسكی نوردیک المپیك اتریش دریافت کند. بعدا مشـخص شـد كه او بهطور طبیعی با جهش در ژن بیانكننـدهی اریتروپـوئتین بهدنیا آمده است. این ویژگی باعث شده بود كه سلولهای قرمـز خـونش بـه میزان ۲۵ تا ۵۰ درصد بیشتر از ورزشكاران دیگـر باشـد و از ایـن طریـق ظرفیت انتقال اكسیژن او نیز افزایش یابد. این كار ممكـن اسـت بـا وارد كردن یك كپی از ژن بیانكنندی EPO به داخل بدن یـک فـرد بـهمنظـور افزایش گلبولهای قرمز خون نیز انجام شـود.
زو و همكارانش برای اولینبار بهطور موفقیتآمیـزی توانستند ژن بیـانكننـدهی اریتروپوئتین را به سلولهای میمونها و موشها وارد كنند که در نتیجه، هماتوكریت (نسبت حجم گلبولهای قرمز به حجم سلولهای خـونی) این حیوانات تا ۸۰ درصد افزایش یافت بهطوری كه آنها مجبور شدند برای جلوگیری از تلف شدن حیوانات خون آنها را رقیق كنند. بیمارانی كه از كمخونی شدید رنج میبرند، مثل بیماران ایدزی و سرطانی بعد از شیمیدرمانی، یا بیمارانی كه دچار نقایص حاد كلیوی هستند، بهدلیل اینكه بدن آنها بهمقدار كافی گلبول قرمز تولید نمیكنـد، ممكـن اسـت از ایـن روش درمانی بهرههای زیادی ببرند. حال ممكن است برخـی از ورزشـكاران نیـز بهطور ناعادلانه برای افـزایش ظرفیـت انتقـال اكسـیژن خـود از ایـن ژن استفاده كنند.
۳. میوستاتین بلاكرها
میوستاتین تنظیمگر منفی رشد عضلانی است و بهوسیلهی سـلولهـای عضلانی سنتز میشود و بهصورت پاراكرین واتوکرین در قلب و عضلات اسكلتی عمل میكند. نقش كامل فیزیولوژیكی آن هنوز بهطور كامل شناخته نشده است، ولی عاملی است كه از رشد و توسعه بافت عضلانی جلوگیری میكند. بهتازگی برخی از پژوهشـگران دسـتهای از مـواد مسدودكنندهی میوستاتین را تولیده كردهاند كه از عمل این فاكتور ضدرشدی، جلوگیری میکند و باعث افزایش بسیار زیادبافت عضلانی از طریـق هایپرتروفی، هایپرپلازی، کاهش چربی و بافت پیوندی در عضله میشوند.
۴. عامل رشد اندوتلیال عروق (VEGF)
این عامل با گسترش دادن شـبكهی عـروق محیطـی مـیتوانـد باعـث افزایش خونرسانی به بافتها، افزایش فراهم اكسیژن و دیگر مواد مغذی، بهتر كار كردن عضلات قلب، ریه و دیگر بخشهای بدن شود. همهی این عوامل باعث به تعـویق افتادن خستگی و افـزایش اسـتقامت فـرد میشـوند. البته این عامل در اصل بهمنظور كمک به بیمارانی كه دچار ایسكمیک قلبی شدهاند، برای ترمیم و گسترش عروق كرونری ساخته شده است. همچنـین این ژن ممكن است به افراد مسنی كه دچار بیماریهـای عـروق محیطـی هستند كمك كند.
۵. عامل رشدی شبهانسولین (IGF-1)
براساس پژوهشهای اخیر، پژوهشگران برای درمان برخی از بیماریهـا، مثل دیستروفیهای عضلانی، دوشـن كـه موجـب ضـعیف شـدن عضلات فرد میشوند، برخـی از فاكتورهـای ژنـی رشـددهنده عضـلات را كشف كردهاند. البته با پا گذاشتن به سنین ۷۰ الی ۸۰ سالگی، بهطور طبیعـی بافتهای عضلانی ضعیف میشوند كه یكی از دلایل اصلی آن ناتوانی بدن در فعال كردن فاكتورهای رشددهندهی عضلانی مثل IGF1 اسـت. ایـن فاكتور رشد ارتباط تنگاتنگی با هورمـون رشـد دارد و بـرای بـروز اثـرات هورمون رشد، نقش واسطهای ایفا میكند.
IGF1 از كبد، بافت عضـلانی و مغز ترشح میشود و طبق پژوهشهای انجامشده، تزریق آن به عضله (همـراه با فعالیت ورزشی حدود ۴۰ درصد، بدون فعالیت ورزشی حـدود ۱۵ درصـد) باعث افزایش تودهی عضلانی میشود. علاوه بر ایـن امـروزه عملكردهای دیگری را برای این عامل رشدی برشمردهاند كه میتوان به ارتباط آن بـا فراینـد پیـری، اسـترس و افسـردگی، درمـان برخـی از بیمـاریهـا مانند MS، آتروفی عضلانی-نخاعی، آلزایمر، سـكته و صـدمات مغـزی اشاره كرد.
شبیهسازی ورزشکاران
فنـاوری شـبیهسـازی بـرای نخسـتین بـار در اوایـل سـال ۱۹۹۷ بـا ایجـاد گوسـفندی بـه نـام دالی اتفاق افتاد كـه از نظـر اخلاقـی سؤالات گـونـاگونی را بـرای مـردم جهـان مطـرح كـرد و بـا اعتراضـات وسیع مواجـه شـد. بـهطـوری كـه سـازمان جهـانی فنـاوری پـس از آن، شـبیهسـازی در انسـان را محكـوم کرد و آن را عملـی غیـراخلاقـی خوانـد. بعدا نظرات متعددی در جهان مطرح شد، یکی از آنها نظریهی آزادی در تولیدمثل اسـت. ایـن نظریـه ممكـن اسـت منجـر به انواع مختلف شبیهسازی شود كه از نظر روبرتسون این مـوارد شامل شبیهسازی جنینهای جفتی، شبیهسـازی كودكـان، شـبیهسازی پارتیز (شبیه مدال طلاآوران المپیک) و شبیهسازی خود فرداست.
بحثهـای مختلـف و مشـكلات متعـددی بـا هـر یـك از ایـن شبیهسازیها همراه است. به همین دلیل مسؤلیت بر دوش اشخاص مسؤل یعنی زوجها و وابستگان آنها است. یک فـرد شـبیهسـازیشـده درک طبیعـی و همچنین پدر و مـادر نـدارد. از سـوی دیگـر شـبیهسـازی ممكـن اسـت ورزشكارانی با تواناییهای ذاتی بیشتر و نخبهی استثنایی را با توانایی مـا فوقانسانی به وجود آورد. تصور میکنید ورزشکاران متقلب هرگز موفق نبودهاند اما تعدادی از آنها از جمله لنس آرمسترانگ هفت مرتبه در «دوچرخهسواری تور دو فرانس» برنده شد.
مانی رامیرز دو دوره برندهی مسابقات قهرمانی بیسبال جهان شد و بن جانسون نیز یک بار توانست برندهی مدال طلای المپیک دوی سرعت شود. اما در نهایت مقامات به تقلب آنها و استفاده از داروهای نیروزا پیبردند و آنها را جریمه کردند هرچند برخی ورزشکاران هم نجات پیدا کردند و کسی متوجه تقلب آنها نشد. دانشمندان بهتازگی گفتهاند در آیندهای نه چندان دور ورزشکاران میتوانند بدون اینکه کسی متوجه شود از داروهای نیروزا برای برنده شدن استفاده کنند بهطوری که کسی متوجه این کار نشود.
دانشمندان بهعنوان مثال برای تغییر ژنهای گیاهی از نوعی ویروس برای تزریق ژن مفید استفاده میکنند. آنها در تئوری میتوانند چنین فرایند مشابهی را برای بهبود ژنتیک ورزشکاران مورد استفاده قرار دهند. پژوهشگران، ویروسی را داخل یک ژن تزریق میکنند که بدن را به تولید پروتئین اریتروپویتین ترغیب میکند که این پروتئین کار اکسیژنرسانی را به بافت انجام میدهد. تشخیص تزریق این پروتئین ساده است و کارشناسان با آزمایشهایی که انجام میدهند بهراحتی میتوانند وجود آن را شناسایی کنند، اما تشخیص حجم بالای این پروتئین که بدن تولید میکند بسیار دشوارتر است.
مقامات مسئول برای شناسایی پروتئین اریتروپویتین بررسی کپیهای بیشتری از این ژن در خون و سایر نمونههای بیولوژیکی بدن ورزشکاران نیاز دارند. این کار در صورتی امکانپذیر است که آنها به کدهای ژنتیکی تغییریافته ورزشکاران آگاه باشند. برخلاف تغییر ژنتیکی که شامل افزودن ژنها است، ویرایش ژنتیکی تنها روی برش و اتصال ژنهایی تمرکز میکند که فرد از قبل داشته است. ژن ویرایششدهی ورزشکار، هیچ ژن اضافی ندارد که مقامات بتوانند آن را پیدا کنند. سازمان مبارزه با دوپینگ برای مقابله با این مسئله، از تمام ورزشکاران المپیک خواسته است تا کپی تمام کدهای ژنتیکی خود را ثبت کنند.
البته درخواست این سازمان مانع از تغییرات ژنتیکی درتمام ورزشها نمیشود زیرا پژوهشگران پیش از اعمال تغییرات ژنتیکی در انسانها، به کپیهای کد ژنتیکی هر ورزشکار نیاز دارند. این سازمان آزمایشهای علمی دقیقی برای کنترل ورزشکاران در اختیار دارد. متخصصان این سازمان پیوسته روشهای تازهای برای ردیابی مواد نیروزا پیدا میکنند. مواد نیروزا به شکلهای مختلف مصرف میشوند و کسانی که برای موفقیت در مسابقات ورزشی با استفاده از این مواد بهصورت خوراکی، تزریق عضلانی، داخل وریدی یا بهصورت شیاف بهدنبال افزایش نیروی بدنی خود و موفقیت بیشتر هستند، کم نیستند.
مواد نیروزا امور مختلفی را در بدن تحت تأثیر قرار میدهند، بهعنوان مثال، دوپینگ هورمونی موجب افزایش رسوب چربی در عضلات قسمت بالا تنه میشود. این سازمان آزمایشهایی در اختیار دارند که رد این مواد را در خون پیدا میکند. البته تولیدکنندگان مواد نیروزا هم بیکار نمیمانند و با استخدام متخصصان ماهر، ترکیبات تازهای تهیه و تولید میکنند. دستهای از این مواد هورمونهای رشد هستند که با دستکاری ژنتیکی برخی از بافتهای بدن میتوان ترشح آنها را افزایش داد.
هورمونهای دوپینگی رشد
گروهی از پژوهشگران بلژیکی موفق شدند با دستکاری ژنتیکی عضلات گوساله، رشد این عضلات را تا جایی تحریک کنند که به رشد خود ادامه دهند و در نهایت بسیار تنومند شوند. در مقابل، گروهی از پژوهشگران آلمانی که با سازمان مبارزه با دوپینگ همکاری میکنند روشی برای پیداکردن رد این هورمون رشد پیدا کردند که در اثر دستکاری ژنتیکی تولید آن افزایش پیدا کرده است. پروفسور پریکلس سیمون از مرکز پژوهشی دوپینگ در دانشگاه ماینز میگوید:
ما میتوانیم رد هورمونهایی را که ترشح آنها افزایش یافته است پیدا کنیم. یعنی رد هورمونهایی که پس از دستکاری ژنتیکی یک عضله، بیشتر شدند. با این روش، حتی ماهها بعد هم هورمونها در خون قابل ردیابی هستند.
به نظر میرسد روشی که پژوهشگران آلمانی ابداع کردهاند راه مطمئنی برای کنترل هورمونهای رشد در خون ورزشکاران است. البته نکتهی قابلتوجه اینجا است که این روش تنها برای ردیابی یک نوع از صدها نوع دستکاری ژنتیکی ممکن در عضلات، تهیه شده است. در نتیجه، بهعقیدهی متخصصانی مانند پروفسور پاتریک دیل، نمیتوان از یک آزمایش مطمئن و راهحلی قطعی صحبت کرد. پروفسور پاتریک دیل، متخصص بیوشیمی است و با مدرسهی ورزش شهر کلن همکاری میکند. او میگوید:
با این روش، مشکل پیدا کردن دوپینگ ژنتیکی حل نشده است. در این روش تنها یک مدل از ژن دستکاریشده در عضلات کشف میشود. از آن مهمتر اینکه ما هنوز هیچ نشانی از موفقیتآمیز بودن استفاده از آن نداریم.
مسئله این است که دستکاری ژنتیکی عضلات، تاکنون تنها در آزمایش روی حیوانات موفقیتآمیز بوده است. در نتیجه، ابتدا باید مراحل عملی آزمایش آن روی انسان طی شود. گام بعد، صدور مجوز قانونی است که در مجموع چندین سال طول خواهد کشید. پروفسور پاتریک دیل میگوید که در مورد ردیابی هورمونهای رشد باید بگویم که براساس تجربهی ما، از زمان ابداع یک روش برای پیداکردن رد این هورمونها در خون، تا مرحلهی صدور مجوز، حداقل هشتسال طول میکشد.
ژندرمانی ورزشكاران و مشكلات اخلاقی آن
در طول دو دههی گذشته درمان آسیبهای ورزشی، بهوسیلهی برنامههـای بازتوانی نوین، روشهای آزمایشگاهی جدیـد و پیشـرفتهـای صـورتگرفته در پژوهشهای بیومكانیكی، توسعه پیدا كرده است. بهدلیل ظرفیت محدود تـرمیم برخـی از آنهـا ماننـد پـارگی مینیسـک داخلی، لهیـدگی غضـروف و شكسـتگیهـای اسـتخوانی، درمـان ایـن آسیبها با محـدودیتهـایی روبهرو اسـت و در برخـی از مـوارد باعـث كنارهگیری مادامالعمر ورزشكاران از صـحنه ورزش مـیشـوند. به همین علت روشهای درمانی جدید سعی دارند تا فراینـد تـرمیم را بـا فـاكتورهـای رشدی تسریع بخشند.
یكی از این روشهای درمانی، ژن درمانی است كـه امكـان درمان آسیبهای شدید و در برخی مواقع غیرقابل برگشـت ورزشـی را بهوجود آورده است. اخیرا پژوهشگران ژندرمانی توانسـتهانـد از طریق تزریق فاکتورهای رشد (BFGF، NGF، BMP-2، IGF-1، TGF-beta، EGF، 24 CDMP، PDGF-AB) به بافــتهــای آسیبدیده به درمان آنها كمک زیادی كننـد. هـماكنـون در سراسـر جهان مراكـز درمـانی متعـددی هسـتند كـه بـرای كمـک بـه درمـان بیماریهای لاعلاجی مانند سـرطان خـون، دیسـتروفی عضـلانی، بیماری شدید وابسته به كروموزوم X همراه بـا بیمـاری نقـص سیسـتم ایمنی و بیماران هموفیلی B، در دست بررسیهای گستردهای در آزمایشگاهها روی حیوانات هستند كه برخـی از ایـن پـژوهشهـا بـه درمـان منجـر شـدهانـد.
در آینـده ای نـه چنـدان دور ممكـن اسـت ورزشكاران نیز برای درمان آسیبهـای ورزشـی خـود از تكنولـوژی ژندرمانی استفاده كنند و به بهانهی استفاده درمانی از این تكنولـوژی بـرای افزایش اجرای خود نیز از آن استفاده كنند یا مسـئولان ورزشـی یـک كشور با آگاهی از این موضوع و بـدون اطـلاع از عواقـب خطرنـاک آن برای ورزشكار، جامعهی ورزشی، رقابتهای ورزشی و ورزشـكارانی كـه از این روشها استفاده نمیكنند، از این روشها بـرای كسـب مـدالهـای بیشتر، بهرهمند شوند.
مشکلات تشخیص دوپینگ ژنی و موضوعات اخلاقی
مهمترین سوالی که در این میان مطرح میشود، سازوکار اجرایی سازمان مبارزه با دوپینگ برای شناسایی این نوع از دوپینگ است، زیرا تشخیص استفاده از روش ویرایش ژنتیکی بسیار دشوار است و امری پیچیده محسوب میشود. این سازمان هنوز به این سؤال که آیا امکان تشخیص این نوع دوپینگ وجود دارد یا نه، پاسخی نداده است؛ به باور کارشناسان، انجام این محدودیت و کنترل آن بسیار دشوار است. همچنین این سازمان از یک دهه پیشتر مطالعات مربوط به شناسایی و تشخیص این روش دوپینگ را آغاز کرده است.
با وجود تلاشهای زیاد، نمونهگیری ژنتیکی از ورزشکاران تنها از چند سال پیش شروع شد. در این فرایند، از نمونههای خون ورزشکاران که در المپیک سال ۲۰۱۶ ریو حضور داشتند آزمایش گرفته شد و مواردی مانند افزوده شدن هورمونها یا ویرایش ژنتیکی در آنها بررسی شد و هنوز هیچ نمونهی مثبتی شناسائی نشده است. بهگفتهی دانشمندان این موضوع بسیار پیچیده است و امکان ایجاد تغییری کوچک در ژنهای انسان بهگونهای وجود دارد که شناسایی آن ممکن نیست یا بهسختی میتوان شواهد آن را پیدا کرد اما این تغییرات کوچک ژنتیکی منجر به افزایش بسیار زیاد عملکرد انسان شود.
در تئوری، گذرنامههای بیولوژیکی که توسط سازمان جهانی مبارزه با دوپینگ در سال ۲۰۰۹ معرفی شده است، میتواند تغییرات غیرمنتظره را در بدن ورزشکار نشان دهد، حتی اگر ژن تغییریافته قابل شناسایی نباشد، میتوان شواهد انجام این عمل را شناسائی کرد. سازمان بهداشت جهانی (WHO) که یکی از نهادهای سازمان ملل متحد است، در تلاش است تا از کارهای دانشمندان در زمینهی تغییر ژنوم انسانی سر در بیاورد تا بتواند از انجام آزمایشهای ژنتیکی غیرمجاز در زمینههای انسانی جلوگیری کند.
سازمان بهداشت جهانی اخیرا اعلام کرد که کمیتهی مشورتی، دستور منع پژوهشهای ژنتیک انسانی را اعلام نکرده، اما معتقد است که پژوهشگران باید قبل از شروع آزمایش، آزمایش خود را به ثبت برسانند. بسیاری از توصیههای این سازمان، نشاندهندهی روشهای پژوهشی بالینی هستند که در حال حاضر در ایالاتمتحده مدیریت میشوند و دانشمندان مجبور هستند تاییدیهی این سازمانهای نظارتی را بهدست بیاورند و مجوز انتشار مطالعات خود را در یک پایگاهدادهی قابل دسترسی دریافت کنند. تدروس آدامان گبریسوس، مدیر کل سازمان جهانی بهداشت، در این رابطه میگوید:
ویرایش ژنها تحولات باور نکردنیای را برای سلامتی انسانها بههمراه خواهد داشت، اما از نظر اخلاقی و پزشکی خطراتی را نیز به همراه دارد.
گبریسوس در ادامهی سخنانش میگوید که سازمان بهداشت جهانی در این راستا به نتایج مختلفی دست یافته و از دانشمندان خود خواسته است تا بهطور موقت پژوهشهای خود را در زمینهی ژنتیک انسانی متوقف کنند؛ بنابراین رهبران در این زمینه میتوانند راههای مسئولانه و اخلاقی را در پیش بگیرند تا از ممنوع شدن دائم این نوع پژوهشها جلوگیری شود، اما این بدان معنی نیست که سازمان جهانی بهداشت میخواهد دانشمندان تمام پژوهشهایشان را تعطیل کنند. مارگارت هامبورگ، مامور کمیتهی پژوهش، در نشست خبری گفت:
کمیته بر این باور است که در حال حاضر عملکرد هر کسی که از عملیات بالینی ویرایش ژنوم زایشی انسان فراتر رود، غیر معتبر خواهد بود؛ هرچند این توصیهها ممکن است تغییر کنند. کارشناسان در طول دو سال آینده، به مشورت با سایر کارشناسان و رهبران برای بررسی نحوهی ویرایش ژنوم انسان خواهند پرداخت تا بتوانند مجموعهی نهایی استانداردهای بینالمللی را در این زمینه اعلام کنند.
یكـی از چـالشهای اخلاقی دوپینـگ ژنی، روشهای تشــخیص آن است كه بهاندازه ی كافی كـارایی ندارنـد و بسـیار مشـكل هسـتند. از طرفی، همواره پیشرفت فناوری داروها و روشهای افزایشدهنده جلــوتر از روشهــای تشــخیص هستند. بــهگفتــهی لاری بــاورز، كارشـناس تشـخیص دوپینـگ آژانـس و رئیس بخش سـمشناسـیمبارزه با دوپینگ آمریكا، با فناوریهای موجـود، تشـخیص دوپینـگ ژنـی كـار بســیار مشــكلی اســت كــه یكــی از دلایل آن شــبیه بــودن بافــت اسـت.
در اصـل، یكـی از مـواردی كه باعث میشود توجه ورزشكاران به دوپینگ ژنی جلب شـود، سـخت بودن تشـخیص آن اسـت و در صـورت انجـام آن توسـط ورزشـكاران، سلامتی آنها به خطر خواهد افتاد، درست مانند پیامـدهـایی كـه بـرای برخی از حیوانات سالم آزمایشگاهی در حین ژن درمانی به وجـود آمـده است. از عواقب وخیم اسـتفاده از ناقـل آدنـوویـروس (rAd) و ناقل همراهبا آدنوویروس (rAAV)، پاسخهای ایمنی و ایمنـی-هومورال است كه در پی تزریق درونغـدهای، درونپوسـتی و درونشـریانی، غلظت پـادتنی سـرم بـه میـزان ۱۰ تـا ۱۰۰۰ برابـر یـا بیشـتر در پـی تزریق rAAV و به میزان ۴ تا ۱۷۰۰ برابر بعـد از تزریـق rAd، افـزایش پیدا میکند.
در سالهای اخیر پژوهشهای گسـتردهای بـرای یـافتن راههای تشخیص دوپینگ ژنی صورت گرفته است. از ویژگیهای مهمی كه هر یک از روشهای تشخیصی باید داشته باشـند ایـن اسـت كه به آسانی در دسترس، تا حد ممكن غیر تهاجمی، نسبتا سریع و ایمن باشند، همچنین باید بین ورزشكارانی كه به دلیـل تركیـب ژنتیكـی، تركیب ژنتیكی تغییریافته بهدلایل طبیعی، تركیب ژنتیكی اصلاحشده با دخالت بشر، دارای ظرفیت افزایشیافته بـرای اجـرای ورزشـی هستند، تفاوت قائل شوند، اما رعایت همهی این موضوعات كـار آسـانی نیست و هزینه و تلاش زیادی را میطلبد.
بهطور خلاصه میتوان كلیه روشهای تشخیص دوپینـگ ژنـیرا بـه دو دسـتهی كلـی تقسـیم كـرد: روشهای تشخیصی مستقیم و غیرمستقیم. روش مستقیم عبارت است از: تشـخیص پروتئین تراژنی و تشخیص ناقل (شـامل ویـروس ضعیفشده یا آدنوویروسها و ناقلهای پلاسمیدی). روش غیرمستقیم نیز شامل اندازهگیری اثرات دوپینگ ژنی بر سلولها، بافتهـای هـدف یـا همگی اندامها هستند.
حال هر یک از این روشها ممكن اسـت مشـكلاتی را بـه همـراه داشته باشند، مثلاً برای تشخیص مستقیم نیاز به نمونهبـرداری از بافـت عضلانی است و با توجه به این موضوع كه همهی ورزشكارانی كه تحـت این آزمایش قرار میگیرند ممكن است اصلا دوپینگ نكرده باشند، ایـن روش تهاجمی ممكن است به توان ورزشی آنها صدمه وارد كند كه این كار نیز غیـراخلاقـی اسـت.
از طرفـی روشهای تشخیص دوپینگی هنـوز در مراحـل آزمایشگاهی هستند و تا اثبات بیخطری آنها و وارد شـدن بـه میـادین ورزشی، راه درازی در پیش است. همچنین اغلب این روشها به تجهیزارت گرانقیمت و هزینههای جانبی بسیار زیاد و متخصصان كارآزمودهای نیاز دارد و زمانبر هستند كه این ویژگیها با اصول اولیهی گفتـهشـده در مـورد هـر یـک از روشهـا مغـایرت دارنـد. در نتیجه چـالشهـای تشخیصی مرتبط با دوپینگ ژنی، هنوز به قوت خود بـاقی هسـتند و بـا وجود پیشرفتهای انجامشده در این زمینه، هنوز تشخیص دوپینگ ژنی كار بسیار مشكلی است.
در نتیجه با توجه به مباحث گفتهشده و براساس نظــر سازمان مبارزه با دوپینگ، دستكاری ژنتیكی در ورزش اگـر بـا هـدف افـزایش توانایی ورزشكار و كسب پیروزی در رقابـتهـا انجـام شـود، مغـایر بـا ارزشهای اخلاقی، حقـوقی و اجتمـاعی در ورزش است و باید ممنوع شود و سلامتی ورزشكاران یكی از مواردی است كه بهدلیل آن حتما از بهكارگیری دوپینگ ژنـی جلـوگیری و بـا آن مبـارزه شود. هر چند كه ممكن است بهعلت استفادههای مفیدی كه در آینـده از دستكاری ژنی برای رفع آسیبهای ورزشی انجام شود، تبصرههـایی برای این موضوع در نظر گرفته شود كه البته تـاكنون این امر تحقق نیافته است.
تشخیص دوپینگ، همیشه چالش بزرگـی پـیش روی مجـامع ضـددوپینگ بوده و است، زیرا همانطور که گفته شد، همـواره روشهـای دوپینگـی جلـوتر از روشهای تشخیصی هستند. در مورد دوپینگ ژنی نیز به خاطر نو بودن، مطمئنا همین مسئله وجود خواهد داشت مگر بـا كمـک فنـاوریهـای موجود، تا حدودی قبل از شیوع زیاد آن روشهایی كشف شـوند تـا از بروز این روش دوپینگی جلوگیری كنند. با این حال آزمـایش ژنتیكـی و نمونهگیری عضلانی (بیوپسی) از ورزشكاران، خود معضل اخلاقی اسـت كه اغلب ورزشكاران به انجام آن تن در نمیدهند و چون این كـار یـک روشی تهاجمی است، ممكن است به توان ورزشكاران صدمه وارد كنـد.
بدون تردید چالشی كه دوپینگ ژنی به وجود آورده و خواهد آورد، چهرهی ورزش را خدشهدار مـیكنـد و در صـورت بـروز ایـن مشـكل در آینـده، شركتهای ساخت ورزشكار هسـتند كـه بـا هـم رقابـت مـیكننـد نـه ورزشكاران. در این صورت اخلاق، برابری و عدالت در ورزش جایگاهی نخواهد داشت.
.: Weblog Themes By Pichak :.